Ren Saposhnikovia divaricata olie til stearinlys og sæbefremstilling engros diffuser æterisk olie ny til rørbrænder diffusorer

Ren Saposhnikovia divaricata olie til stearinlys og sæbefremstilling engros diffuser æterisk olie ny til rørbrænder diffusere Udvalgt billede

kort beskrivelse:

2.1. Udarbejdelse af SDE

Jordstænglerne af SD blev købt som en tørret urt fra Hanherb Co. (Guri, Korea). Plantematerialerne blev bekræftet taksonomisk af Dr. Go-Ya Choi fra Korea Institute of Oriental Medicine (KIOM). En kuponprøve (nummer 2014 SDE-6) blev deponeret i Korean Herbarium of Standard Herbal Resources. Tørrede jordstængler af SD (320 g) blev ekstraheret to gange med 70 % ethanol (med 2 timers tilbagesvaling), og ekstrakten blev derefter koncentreret under reduceret tryk. Afkogningen blev filtreret, lyofiliseret og opbevaret ved 4°C. Udbyttet af tørret ekstrakt fra rå udgangsmaterialer var 48,13 % (vægt/vægt).

2.2. Kvantitativ højtydende væskekromatografi (HPLC) analyse

Kromatografisk analyse blev udført med et HPLC-system (Waters Co., Milford, MA, USA) og en fotodiode array-detektor. Til HPLC-analysen af SDE er prim-O-glucosylcimifugin standard blev købt fra Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry (Gyeongsan, Korea), ogsek-O-glucosylhamaudol og 4′-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisaminol blev isoleret i vores laboratorium og identificeret ved spektralanalyser, primært ved NMR og MS.

SDE-prøver (0,1 mg) blev opløst i 70% ethanol (10 ml). Kromatografisk adskillelse blev udført med en XSelect HSS T3 C18-søjle (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Den mobile fase bestod af acetonitril (A) og 0,1 % eddikesyre i vand (B) ved en strømningshastighed på 1,0 ml/min. Et flertrins gradientprogram blev brugt som følger: 5% A (0 min), 5-20% A (0-10 min), 20% A (10-23 min) og 20-65% A (23-40 min. ). Detektionsbølgelængden blev scannet ved 210-400 nm og optaget ved 254 nm. Injektionsvolumenet var 10,0μL. Standardopløsninger til bestemmelse af tre kromoner blev fremstillet ved en slutkoncentration på 7,781 mg/ml (prim-O-glucosylcimifugin), 31,125 mg/ml (4'-O-β-D-glucosyl-5-O-methylvisaminol) og 31,125 mg/ml (sek-O-glucosylhamaudol) i methanol og holdt ved 4°C.

2.3. Evaluering af antiinflammatorisk aktivitetIn vitro

2.3.1. Cellekultur og prøvebehandling

RAW 264.7-celler blev opnået fra American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) og dyrket i DMEM-medium indeholdende 1 % antibiotika og 5,5 % FBS. Celler blev inkuberet i en fugtig atmosfære af 5% CO2 ved 37°C. For at stimulere cellerne blev mediet erstattet med frisk DMEM-medium og lipopolysaccharid (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) ved 1μg/ml blev tilsat i nærvær eller fravær af SDE (200 eller 400μg/ml) i yderligere 24 timer.

2.3.2. Bestemmelse af nitrogenoxid (NO), prostaglandin E2 (PGE2), tumornekrosefaktor-α(TNF-α) og Interleukin-6 (IL-6) produktion

Celler blev behandlet med SDE og stimuleret med LPS i 24 timer. NO-produktion blev analyseret ved at måle nitrit ved hjælp af Griess-reagenset ifølge en tidligere undersøgelse [12]. Sekretion af de inflammatoriske cytokiner PGE2, TNF-αog IL-6 blev bestemt under anvendelse af et ELISA-kit (R&D-systemer) ifølge producentens instruktioner. Virkningerne af SDE på NO og cytokinproduktion blev bestemt ved 540 nm eller 450 nm under anvendelse af en Wallac EnVision™mikropladelæser (PerkinElmer).

2.4. Evaluering af antiosteoarthritis aktivitetIn Vivo

2.4.1. Dyr

Sprague-Dawley-hanrotter (7 uger gamle) blev købt fra Samtako Inc. (Osan, Korea) og anbragt under kontrollerede forhold med en 12-timers lys/mørke-cyklus kl.°C og% fugtighed. Rotter blev forsynet med en laboratoriefoder og vandad libitum. Alle eksperimentelle procedurer blev udført i overensstemmelse med National Institutes of Health (NIH) retningslinjer og godkendt af Animal Care and Use Committee på Daejeon universitetet (Daejeon, republikken Korea).

2.4.2. Induktion af OA med MIA hos rotter

Dyrene blev randomiseret og tildelt behandlingsgrupper før påbegyndelsen af undersøgelsen (per gruppe). MIA opløsning (3 mg/50μL af 0,9% saltvand) blev direkte injiceret i det intraartikulære rum i højre knæ under bedøvelse induceret med en blanding af ketamin og xylazin. Rotter blev opdelt tilfældigt i fire grupper: (1) saltvandsgruppen uden MIA-injektion, (2) MIA-gruppen med MIA-injektion, (3) den SDE-behandlede gruppe (200 mg/kg) med MIA-injektion og (4 ) den indomethacin-(IM-)-behandlede gruppe (2 mg/kg) med MIA-injektion. Rotter blev administreret oralt med SDE og IM 1 uge før MIA-injektion i 4 uger. Doseringen af SDE og IM anvendt i denne undersøgelse var baseret på dem, der blev anvendt i tidligere undersøgelser [10,13,14].

2.4.3. Målinger af bagpotevægtbærende fordeling

Efter OA-induktion blev bagpoternes oprindelige balance i vægtbærende evne forstyrret. En inkapacitetstester (Linton instrumentation, Norfolk, UK) blev brugt til at evaluere ændringer i den vægtbærende tolerance. Rotter blev forsigtigt anbragt i målekammeret. Den vægtbærende kraft, som bagbenet udøvede, blev beregnet i gennemsnit over en 3 s periode. Vægtfordelingsforholdet blev beregnet ved følgende ligning: [vægt på højre bagben/(vægt på højre bagben + vægt på venstre bagben)] × 100 [15].

2.4.4. Målinger af serumcytokinniveauer

Blodprøverne blev centrifugeret ved 1.500 g i 10 minutter ved 4°C; derefter blev serumet opsamlet og opbevaret ved -70°C indtil brug. Niveauerne af IL-1βIL-6, TNF-α, og PGE2 i serumet blev målt under anvendelse af ELISA-kits fra R&D Systems (Minneapolis, MN, USA) i henhold til producentens instruktioner.

2.4.5. Kvantitativ RT-PCR-analyse i realtid

Total RNA blev ekstraheret fra knæledsvæv under anvendelse af TRI-reagenset® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), revers-transskriberet til cDNA og PCR-amplificeret ved hjælp af et TM One Step RT PCR-kit med SYBR-grønt (Applied Biosystems) , Grand Island, NY, USA). Kvantitativ realtids-PCR blev udført under anvendelse af Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-systemet (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Primersekvenserne og probe-sekvensen er vist i tabel1. Alikvoter af prøve-cDNA'er og en tilsvarende mængde GAPDH-cDNA blev amplificeret med TaqMan® Universal PCR-masterblandingen indeholdende DNA-polymerase i henhold til producentens instruktioner (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR-betingelser var 2 minutter ved 50°C, 10 minutter ved 94°C, 15 sekunder ved 95°C og 1 minut ved 60°C i 40 cyklusser. Koncentrationen af målgenet blev bestemt ved anvendelse af den sammenlignende Ct-metode (tærskelcyklusnummer ved krydspunkt mellem amplifikationsplot og tærskel) ifølge producentens instruktioner.

FOB pris:USD 0,5 - 9.999 / stk

Min. ordremængde:100 stk/stykker

Forsyningsevne:10000 styk/stykker om måneden

Send e-mail til os

Produktdetaljer

Produkt Tags

Slidgigt (OA) er den hyppigste muskel- og skeletlidelse og den hyppigste degenerative ledsygdom hos ældre [1]. OA er en tilstand, der til dels skyldes skade, tab af bruskstruktur og funktion og dysregulering af proinflammatoriske og antiinflammatoriske veje [2,3]. Det påvirker primært ledbrusken og subkondrale knogler i synovialleddene og resulterer i ledsvigt, hvilket fører til smerter ved vægtbæring, herunder gang og stående [4].

Der er ingen kur mod OA, da det er meget vanskeligt at genoprette brusken, når den først er ødelagt [5]. Målet med behandlingen er at lindre smerter, vedligeholde eller forbedre ledmobiliteten, øge leddenes styrke og minimere de invaliderende virkninger af sygdommen. Farmakologiske behandlinger af OA sigter mod at reducere smerte for at øge patientens ledfunktion og livskvalitet. Selvom bruskdestruktion er hovedbegivenheden ved OA, er nedbrydningen af kollagen den fundamentale hændelse, der bestemmer den irreversible progression af OA i forbindelse med inflammation [6,7]. Behandlinger med antiinflammatorisk og chondrobeskyttende aktivitet forventes at lindre smerte og opretholde matrixintegritet hos OA-patienter.

Derfor vil faldende inflammation sandsynligvis være gavnlig i OA-behandling. Nylige undersøgelser tyder på beskyttende roller for urteressourcer på progressionen af OA, i form af afhjælpning af chondrocytbetændelse og yderligere bruskødelæggelse, gennem deres evne til at interagere med led-associeret væv, hvilket resulterer i lindring af ledsmerter [8].

Roden tilSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) er blevet meget brugt i traditionel medicin til behandling af hovedpine, smerter, betændelse og gigt i Korea og Kina [9,10]. De forskellige farmakologiske virkninger afSaposhnikovia divaricata(SD) omfatter også antiinflammatoriske, smertestillende, febernedsættende og antiartritiske egenskaber [9,11]. En nylig undersøgelse viste, at SD-kromonekstrakt besidder potentielle antirheumatoid arthritis-effekter i en musemodel af kollagen-induceret arthritis [10]; Der er dog kun udført få undersøgelser for at understøtte den anti-inflammatoriske og anti-arthritis aktivitet afSaposhnikovia divaricataekstrakt (SDE).

Derfor undersøgte nærværende undersøgelse de antiinflammatoriske og antislidgigt aktiviteter af et 70% ethanolekstrakt af SD. Først blev den antiinflammatoriske effekt af SDE evalueretin vitroi LPS-inducerede RAW 264.7-celler. Dernæst blev antiosteoarthritis-effekten af SDE målt ved at vurdere vægtbærende fordeling, nedbrydning af ledbrusk og inflammatoriske responser i en rottemodel af mononatriumiodacetat-(MIA-)-induceret OA.