Den kinesiske farmakopé (2020-udgaven) kræver, at methanolekstraktet af YCH ikke bør være mindre end 20,0 % [2], uden andre kvalitetsevalueringsindikatorer specificeret. Resultaterne af denne undersøgelse viser, at indholdet af methanolekstrakterne fra de vilde og dyrkede prøver begge opfyldte farmakopéstandarden, og der var ingen signifikant forskel mellem dem. Derfor var der ingen tilsyneladende kvalitetsforskel mellem vilde og dyrkede prøver ifølge dette indeks. Imidlertid var indholdet af totale steroler og totale flavonoider i de vilde prøver signifikant højere end indholdet i de dyrkede prøver. Yderligere metabolomisk analyse afslørede rigelig metabolitdiversitet mellem de vilde og dyrkede prøver. Derudover blev 97 signifikant forskellige metabolitter screenet ud, som er opført iSupplerende tabel S2. Blandt disse signifikant forskellige metabolitter er β-sitosterol (ID er M397T42) og quercetinderivater (M447T204_2), som er blevet rapporteret at være aktive ingredienser. Tidligere urapporterede bestanddele, såsom trigonellin (M138T291_2), betain (M118T277_2), fustin (M269T36), rotenon (M241T189), arctiin (M557T165) og logansyre (M399T28 inkluderet blandt de forskellige metabolitter). Disse komponenter spiller forskellige roller i antioxidation, anti-inflammatorisk, fjernelse af frie radikaler, anti-cancer og behandling af åreforkalkning og kan derfor udgøre formodede nye aktive komponenter i YCH. Indholdet af aktive ingredienser bestemmer effektiviteten og kvaliteten af de medicinske materialer [7]. Sammenfattende har methanolekstrakt som det eneste YCH kvalitetsevalueringsindeks nogle begrænsninger, og mere specifikke kvalitetsmarkører skal udforskes yderligere. Der var signifikante forskelle i det totale antal steroler, det samlede antal flavonoider og indholdet af mange andre differentielle metabolitter mellem den vilde og den dyrkede YCH; så der var potentielt nogle kvalitetsforskelle mellem dem. Samtidig kan de nyligt opdagede potentielle aktive ingredienser i YCH have en vigtig referenceværdi for undersøgelsen af det funktionelle grundlag for YCH og den videre udvikling af YCH-ressourcer.
Betydningen af ægte medicinske materialer har længe været anerkendt i den specifikke oprindelsesregion for fremstilling af kinesisk urtemedicin af fremragende kvalitet [
8]. Høj kvalitet er en væsentlig egenskab ved ægte medicinske materialer, og habitat er en vigtig faktor, der påvirker kvaliteten af sådanne materialer. Lige siden YCH begyndte at blive brugt som medicin, har det længe været domineret af vilde YCH. Efter den vellykkede introduktion og domesticering af YCH i Ningxia i 1980'erne, skiftede kilden til Yinchaihu-medicinske materialer gradvist fra vild til dyrket YCH. Ifølge en tidligere undersøgelse af YCH-kilder [
9] og vores forskningsgruppes feltundersøgelse, er der væsentlige forskelle i udbredelsesområderne for de dyrkede og vilde lægemidler. Den vilde YCH er hovedsageligt udbredt i den autonome Ningxia Hui-region i Shaanxi-provinsen, der støder op til den tørre zone i Indre Mongoliet og det centrale Ningxia. Især er ørkensteppen i disse områder det mest egnede levested for YCH-vækst. I modsætning hertil er den dyrkede YCH hovedsageligt distribueret syd for det vilde udbredelsesområde, såsom Tongxin County (Cultivated I) og dets omkringliggende områder, som er blevet den største dyrknings- og produktionsbase i Kina, og Pengyang County (Cultivated II) , som ligger i et mere sydligt område og er et andet produktionsområde for dyrket YCH. Desuden er levestederne for de to ovennævnte dyrkede områder ikke ørkensteppe. Derfor er der udover produktionsmåden også betydelige forskelle i levestederne for den vilde og dyrkede YCH. Habitat er en vigtig faktor, der påvirker kvaliteten af urtemedicinske materialer. Forskellige levesteder vil påvirke dannelsen og akkumuleringen af sekundære metabolitter i planterne og derved påvirke kvaliteten af lægemidler [
10,
11]. Derfor kan de signifikante forskelle i indholdet af totale flavonoider og totale steroler og ekspressionen af de 53 metabolitter, som vi fandt i denne undersøgelse, være resultatet af feltforvaltning og habitatforskelle.
En af de vigtigste måder, hvorpå miljøet påvirker kvaliteten af medicinske materialer, er ved at udøve stress på kildeplanterne. Moderat miljøstress har en tendens til at stimulere akkumuleringen af sekundære metabolitter [
12,
13]. Vækst/differentieringsbalancehypotesen siger, at planterne primært vokser, når der er tilstrækkeligt med næringsstoffer, mens planterne, når der er mangel på næringsstoffer, hovedsageligt differentierer og producerer flere sekundære metabolitter [
14]. Tørkestress forårsaget af vandmangel er den vigtigste miljøbelastning, som planter står over for i tørre områder. I denne undersøgelse er vandtilstanden for den dyrkede YCH mere rigelig, med årlige nedbørsniveauer betydeligt højere end for den vilde YCH (vandforsyningen til Kultiveret I var ca. 2 gange så stor som Wild; Kultiveret II var ca. 3,5 gange så stor som for Wild. ). Desuden er jorden i det vilde miljø sandjord, men jorden i landbrugsjorden er lerjord. Sammenlignet med ler har sandjord en dårlig vandbindingsevne og er mere tilbøjelig til at forværre tørkestress. Samtidig blev dyrkningsprocessen ofte ledsaget af vanding, så graden af tørkestress var lav. Vild YCH vokser i barske naturlige tørre levesteder, og derfor kan den lide under mere alvorlig tørkestress.
Osmoregulering er en vigtig fysiologisk mekanisme, hvorved planter kan klare tørkestress, og alkaloider er vigtige osmotiske regulatorer i højere planter [
15]. Betainer er vandopløselige alkaloide kvaternære ammoniumforbindelser og kan fungere som osmoprotektanter. Tørkestress kan reducere cellers osmotiske potentiale, mens osmoprotektanter bevarer og vedligeholder strukturen og integriteten af biologiske makromolekyler og effektivt afhjælper skaderne forårsaget af tørkestress på planter [
16]. For eksempel, under tørkestress, steg betainindholdet i sukkerroer og Lycium barbarum betydeligt [
17,
18]. Trigonelline er en regulator af cellevækst, og under tørkestress kan det forlænge længden af plantecellecyklussen, hæmme cellevækst og føre til cellevolumen svind. Den relative stigning i koncentrationen af opløst stof i cellen gør planten i stand til at opnå osmotisk regulering og forbedre dens evne til at modstå tørkestress [
19]. JIA X [
20] fandt, at med en stigning i tørkestress producerede Astragalus membranaceus (en kilde til traditionel kinesisk medicin) mere trigonelline, som virker til at regulere osmotisk potentiale og forbedre evnen til at modstå tørkestress. Flavonoider har også vist sig at spille en vigtig rolle i planteresistens over for tørkestress [
21,
22]. Et stort antal undersøgelser har bekræftet, at moderat tørkestress var befordrende for akkumulering af flavonoider. Lang Duo-Yong et al. [
23] sammenlignede virkningerne af tørkestress på YCH ved at kontrollere vandholdende kapacitet i marken. Det viste sig, at tørkestress hæmmede væksten af rødder til en vis grad, men ved moderat og alvorlig tørkestress (40 % markvandholdeevne) steg det totale flavonoidindhold i YCH. I mellemtiden kan phytosteroler under tørkestress virke til at regulere cellemembranens fluiditet og permeabilitet, hæmme vandtab og forbedre stressresistens [
24,
25]. Derfor kan den øgede akkumulering af totale flavonoider, totale steroler, betain, trigonellin og andre sekundære metabolitter i vild YCH være relateret til højintensitets tørkestress.
I denne undersøgelse blev KEGG pathway berigelsesanalyse udført på de metabolitter, der viste sig at være signifikant forskellige mellem den vilde og den dyrkede YCH. De berigede metabolitter omfattede dem, der var involveret i metabolismen af ascorbat og aldarat, aminoacyl-tRNA-biosyntese, histidin-metabolisme og beta-alanin-metabolisme. Disse metaboliske veje er tæt forbundet med plantestressresistensmekanismer. Blandt dem spiller ascorbatmetabolisme en vigtig rolle i planteantioxidantproduktion, kulstof- og nitrogenmetabolisme, stressresistens og andre fysiologiske funktioner [
26]; aminoacyl-tRNA biosyntese er en vigtig vej for proteindannelse [
27,
28], som er involveret i syntesen af stress-resistente proteiner. Både histidin- og β-alanin-veje kan øge planternes tolerance over for miljøstress [
29,
30]. Dette indikerer yderligere, at forskellene i metabolitter mellem den vilde og dyrkede YCH var tæt forbundet med stressresistensprocesserne.
Jord er det materielle grundlag for vækst og udvikling af lægeplanter. Kvælstof (N), fosfor (P) og kalium (K) i jorden er vigtige næringsstoffer for planters vækst og udvikling. Jordens organiske stof indeholder også N, P, K, Zn, Ca, Mg og andre makroelementer og sporstoffer, der kræves til lægeplanter. For store eller mangelfulde næringsstoffer eller ubalancerede næringsstofforhold vil påvirke væksten og udviklingen og kvaliteten af medicinske materialer, og forskellige planter har forskellige næringsstofbehov [
31,
32,
33]. For eksempel fremmede en lav N-stress syntesen af alkaloider i Isatis indigotica og var gavnlig for ophobningen af flavonoider i planter som Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge og Dichondra repens Forst. I modsætning hertil hæmmede for meget N akkumuleringen af flavonoider i arter som Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis og Ginkgo biloba og påvirkede kvaliteten af medicinske materialer [
34]. Anvendelsen af P-gødning var effektiv til at øge indholdet af glycyrrhizinsyre og dihydroacetone i Ural lakrids [
35]. Når påføringsmængden oversteg 0·12 kg·m−2, faldt det totale flavonoidindhold i Tussilago farfara [
36]. Anvendelsen af en P-gødning havde en negativ effekt på indholdet af polysaccharider i den traditionelle kinesiske medicin rhizoma polygonati [
37], men en K-gødning var effektiv til at øge indholdet af saponiner [
38]. Tilførsel af 450 kg·hm−2 K gødning var det bedste til vækst og saponinakkumulering af to år gammel Panax notoginseng [
39]. Under forholdet N:P:K = 2:2:1 var de samlede mængder af hydrotermisk ekstrakt, harpagide og harpagoside de højeste [
40]. Det høje forhold mellem N, P og K var gavnligt for at fremme væksten af Pogostemon-hytten og øge indholdet af flygtig olie. Et lavt forhold mellem N, P og K øgede indholdet af de vigtigste effektive komponenter i Pogostemon cablin stængelbladolie [
41]. YCH er en gold-jord-tolerant plante, og den kan have specifikke krav til næringsstoffer som N, P og K. I denne undersøgelse, sammenlignet med den dyrkede YCH, var jorden på de vilde YCH-planter relativt gold: jordindholdet af organisk stof, total N, total P og total K var henholdsvis ca. 1/10, 1/2, 1/3 og 1/3 af de dyrkede planter. Derfor kan forskellene i jordens næringsstoffer være en anden årsag til forskellene mellem metabolitterne påvist i den dyrkede og vilde YCH. Weibao Ma et al. [
42] fandt, at anvendelsen af en vis mængde N-gødning og P-gødning forbedrede udbyttet og kvaliteten af frø væsentligt. Virkningen af næringsstoffer på kvaliteten af YCH er imidlertid ikke klar, og befrugtningsforanstaltninger for at forbedre kvaliteten af medicinske materialer kræver yderligere undersøgelse.
Kinesiske naturlægemidler har karakteristika af "Gunstige levesteder fremmer udbyttet, og ugunstige levesteder forbedrer kvaliteten" [
43]. I processen med et gradvist skift fra vild til dyrket YCH, ændrede planternes habitat sig fra den tørre og golde ørkensteppe til frugtbar landbrugsjord med rigeligere vand. Levestedet for den dyrkede YCH er overlegen, og udbyttet er højere, hvilket er nyttigt til at imødekomme markedsefterspørgslen. Imidlertid førte dette overlegne habitat til betydelige ændringer i metabolitterne af YCH; om dette er befordrende for at forbedre kvaliteten af YCH, og hvordan man opnår en højkvalitetsproduktion af YCH gennem videnskabsbaserede dyrkningsforanstaltninger, vil kræve yderligere forskning.
Simulativ habitatdyrkning er en metode til at simulere habitat og miljøforhold for vilde lægeplanter, baseret på viden om planternes langsigtede tilpasning til specifikke miljøbelastninger [
43]. Ved at simulere forskellige miljøfaktorer, der påvirker de vilde planter, især det oprindelige levested for planter brugt som kilder til autentiske medicinske materialer, bruger tilgangen videnskabeligt design og innovativ menneskelig indgriben til at balancere væksten og sekundær metabolisme af kinesiske lægeplanter [
43]. Metoderne sigter mod at opnå de optimale ordninger for udvikling af medicinske materialer af høj kvalitet. Simulativ habitatdyrkning bør give en effektiv måde for højkvalitetsproduktion af YCH, selv når det farmakodynamiske grundlag, kvalitetsmarkører og responsmekanismer på miljøfaktorer er uklare. I overensstemmelse hermed foreslår vi, at videnskabelige design- og markforvaltningsforanstaltninger i dyrkning og produktion af YCH skal udføres med reference til de miljømæssige egenskaber ved vild YCH, såsom tørre, golde og sandede jordforhold. Samtidig er det også håbet, at forskere vil foretage mere dybdegående forskning i YCH's funktionelle materialegrundlag og kvalitetsmarkører. Disse undersøgelser kan give mere effektive evalueringskriterier for YCH og fremme højkvalitetsproduktion og bæredygtig udvikling af industrien.